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流程式分析仪的标准操作规程

更新时间:2025-11-07浏览:66次

流程式分析仪(以流式细胞分析仪为例)的标准操作规程涵盖开机准备、运行监控、关机维护等全流程,需严格遵循参数设置、样品处理、安全防护等规范,以下为具体操作步骤及注意事项:  
一、开机前准备  
环境检查  
确保实验室环境符合要求,如温度18-25℃、湿度40%-60%、通风良好。  
检查电源、气源(如鞘液、压缩空气)是否正常,避免电压波动或气源污染。  
仪器状态检查  
检查仪器外观是否完好,管路连接是否牢固,无泄漏或堵塞。  
确认鞘液桶液位充足(通常八分满),废液桶为空且桶盖旋紧。  
检查液流过滤器,排除气泡,确保液流稳定。  
试剂与样品准备  
使用符合分析纯(AR)或更高纯度的试剂,如荧光抗体、溶血素等。  
样品需根据实验要求预处理,如全血需抗凝处理,细胞培养液需过滤去除杂质。  
二、开机与预热  
开启仪器  
依次打开稳压电源、变压器、流式细胞仪电源及周边设备(如打印机、计算机)。  
启动仪器后,等待预热至稳定状态(通常需30分钟),确保激光、液流等系统正常运行。  
质控程序  
运行质控样品(如荧光微球),验证仪器灵敏度、分辨率及补偿是否合格。  
若质控失败,需检查试剂、管路或仪器状态,重新校准后方可进行实验。  
三、样品分析与运行  
参数设置  
根据实验需求设置激光功率、荧光通道、流速、采集时间等参数。  
设置阈值以排除背景噪声,确保信号准确性。  
如需多色荧光分析,需进行补偿调节,避免荧光溢出干扰。  
样品进样  
将处理好的样品(如标记荧光的细胞悬液)注入进样管,确保无气泡或沉淀。  
启动进样程序,观察液流是否稳定,避免堵塞或泄漏。  
数据采集与监控  
运行实验时,实时监控细胞图谱、数据及仪器状态(如压力、温度)。  
若出现异常(如基线漂移、液流中断),需立即停止实验并排查原因。  
四、实验结束与关机  
数据保存与分析  
实验结束后,自动生成报告并保存原始数据(如FCS文件)。  
使用专业软件(如CytExpert、FlowJo)进行数据分析,包括细胞分群、统计等。  
仪器清洗与维护  
用蒸馏水或专用清洗液冲洗管路,避免残留样品或试剂腐蚀仪器。  
清洁仪器表面及进样口,更换污染的滤芯或管路。  
定期校准仪器(如每月一次),确保性能稳定。  
关机程序  
依次关闭仪器电源、周边设备及稳压电源。  
填写《仪器使用记录》,记录实验内容、仪器状态及维护情况。  
五、安全注意事项  
个人防护  
操作时佩戴实验服、手套及护目镜,避免接触有毒试剂或激光。  
废液及样品需按生物危害标准处理,防止交叉污染。  
仪器安全  
避免高压或高温部件直接接触,防止烫伤或电击。  
定期检查仪器接地情况,确保电气安全。  
应急处理  
若发生试剂泄漏或仪器故障,立即停止实验并疏散人员。  
按照实验室应急预案处理,如使用灭火器、吸附材料等。

 

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