食品细菌快速测定仪的操作原理和方法因仪器类型而异,以下是几种常见类型的操作原理及方法:
一、操作原理
ATP生物发光法:
原理:ATP(三磷酸腺苷)是所有生物细胞中均有的能量分子,测定出样品中细菌细胞的ATP含量,即可得知细菌数。该仪器利用生化作用使细菌细胞的ATP发光,以其光亮度测定细菌量,同时用生物方法分离非细菌细胞的ATP以避免假阳性,并用化学手段除去干扰物质(如盐、商业消毒剂等)的萃灭作用以避免假阴性。
过氧化物酶检测法:
原理:细菌、真菌等好氧微生物在新陈代谢时产生一种过氧化物酶,仪器检测的就是过氧化物酶。过氧化物酶的产生与生物活性的高低成一定比例,因此样品中现存的酶的数量可以反映当前总的生物活性。
二、操作方法
ATP生物发光法测定仪:
准备阶段:打开机器,点击检测,仪器提示“放入拭子”进入检测界面。从冰箱中取出拭子,放置10-15分钟,待恢复至室温后使用。
采样阶段:从套管里取出拭子,一手捏住连接头,擦拭物体表面(如45°倾斜,10×10cm表面)。将采集器插回套管。
处理阶段:一手捏住连接头,一手捏住囊体上部,来回弯折,直至折断阀门。挤压拭子头3次(或轻甩5下拭子),使拭子头中的液体全部被挤出。
检测阶段:立即将拭子插入仪器中检测,点击检测按钮,15秒后出检测结果。
基于过氧化物酶检测的仪器(如HMBX仪器):
液体样品:取1支空的测试管,移去皮塞,向内面加10滴50C试剂,然后用注射器取10ml的样品加入试管中。加10滴50R试剂于试管中,用皮塞盖好反应管,用排风装置刺破皮塞排2-3次后移去,摇摆试管混合试剂,等15分钟左右,再摇摆试管。打开仪器开关“ON”,3-4秒后显示“00.00”,轻弹反应管使管壁上的液体流下,插入反应管,用探针开始测量,读数BRM,使用“mode”读出CFU。
固体样品:取1g样品加入到预先装入试剂的试管中,后续步骤与液体样品相同。